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細胞培養常遇問題集錦(六)
發布時間: 2021-12-01 點擊次數: 1277次26、
▲問:有時候細胞和細胞之間就會出現這種小黑點,高倍鏡下看少數在原地打轉,但是培養液不渾濁。那其中不會動的是細菌嗎?
答:原地打轉的可能為黑膠蟲,會動的是細菌,細菌有鞭毛。黑膠蟲是一種現象,身份可能是細菌,有鞭毛會游動。
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問:想問一下,已經使用三抗以及抗支原體的藥物培養細胞一周,但還是有少量黑膠蟲,但細胞生長狀態還好,這樣的話接下來還需要處理嘛?好像有一種有少量黑膠蟲但不影響細胞狀態可以不做處理的說法?
答:一周,黑膠蟲數量減少,已經見效了,但還是要繼續處理,因為黑膠蟲和細胞有此消彼長的特點,細胞復蘇或剛傳代時,因為此時細胞狀態差,所以特別容易爆發黑膠蟲,黑膠蟲數量增多,當細胞復蘇率增強時,黑膠蟲數量會減少。
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問:話說養細胞的時候,一直加雙抗,會對哪些實驗有影響呢?之前聽說做干擾的時候,要撤雙抗。
答:一般做功能學實驗,藥理學,毒理學,信號通路都要撤掉雙抗。
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問:Cho傳代接種密度0.4 e5,4天才長到11e5,是怎么回事?DT從16.5變成20了。一直都用的一樣的培養基,是不是凍溶會影響?是cho細胞,搖瓶培養。
答:檢查一下營養體系是不是不適合,如不是,那就考慮是胰酶消化這一步是不是有問題。你這邊是把cho貼壁馴化成懸浮了。
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問:請問怎么培養破骨細胞?怎么提取到培養的protocol?遇到一個情況,怎么消化也消化不下來,想從源頭找一找,是什么原因?
答:破骨細胞的培養方法主要有:骨髓機械分離法,骨髓細胞誘導法,脾干細胞誘導法,血液單核細胞誘導法,小鼠RAW264.7細胞系誘導法及骨巨細胞瘤分離法。
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